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    Drug discovery
    药物发现

    酵母菌蛋白表达系统

    酵母表达系统兼有原核和高等真核系统的优点，具备培养条件普通、生长速度快、成本相对较低、能进行蛋白翻译后加工、易获得可溶性活性重组蛋白等特点，被广泛用于重组蛋白尤其是真核蛋白的生产制备。其中巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）因其生长速度快、商业化表达载体丰富、可获得高效的分泌表达等优点，使其成为酵母表达重组蛋白的优先选择。
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    服务项目
    s36沙龙会科研人员建立了成熟的酵母表达纯化服务平台，提供优质的重组蛋白在毕赤酵母中的表达与纯化服务。


    • 酵母表达系统服务项目:
      重组酵母表达质粒构建；重组质粒电转化；重组表达子筛选；小规模蛋白表达和纯化（2L培养基培养产物）；大规模蛋白表达和纯化（10L以上）。
    项目步骤
    步骤实验内容实验时间备注
    1重组酵母表达质粒构建2 周可选择不同载体；不同亲和标签；分泌或胞内表达
    2重组质粒电转化1周不同表达菌株可选， PCR 鉴定5-10个克隆
    3重组表达子筛选3-4周5-10个克隆筛选， Zeocin抗生素浓度筛选重组子，结合Western blot 方法鉴定重组蛋白表达
    4小规模蛋白表达和纯化2-4周优化培养基，菌体密度，甲醇浓度，诱导时间等
    5大规模蛋白表达和纯化根据表达体积商定可选择摇瓶或者发酵罐培养
    备注
    Remarks

    您可根据实验需求选择上述任一实验内容，或相关实验内容的组合

    纯化时选用亲和纯化、离子柱纯化、疏水填料纯化和分子筛纯化； 蛋白本身特性，表达系统的选择会影响最终蛋白的纯度和活性。

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